实验原理 |
酶联免疫吸附实验(ELIAS)即将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行的技术。该技术可用于检测大分子抗原和特异性抗体等,具有快速、灵敏、简便、载体易于标准化等有点。 |
标本要求 |
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。马上进行实验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。 |
2.不能检测含NAN3的样品,因NAN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。 |
操作程序 |
准备试剂、样品和标准品→→加入准备好的样品和标准品,37℃反应30分钟→→洗板5次,加入酶标试剂,37℃反应30分钟→→洗板5次,加入显色液A、B,37℃显色10分钟→→加入终止液→→15分钟内读OD值→→计算 |
注意事项 |
1. 鸡肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA Kit试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被开封后如未使用完,板条应装入密封袋中保存。 |
2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。 |
3. 各布加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免实验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排加样。 |
4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高)(样品OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(N倍)后再测定计算时请最后乘以总稀释倍数( ×N×5)。 |
5. 封板膜只限一次使用,以避免交叉污染。 |
6. 底物请避光保存 |
7. 严格按照说明书的操作进行,实验结果判定必须以酶标仪读数为准。 |
8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 |
9. 鸡肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA Kit试剂不同批号组分不得混用。 |
保存条件及有效期 |
1.试剂盒保存:2-8℃ |
2.有效期:6个月 |